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肝病患者,当肝细胞坏死后,它的残片被枯否细胞或巨噬细胞所吞噬,激活释放出多种细胞因子,继而又激活贮脂细胞向肌纤维母细胞转化,产生各种细胞外基质成分.这些成分与其降解产物以及参与代谢的酶进人血液中,可作为肝纤维化血清标志物.细胞外基质成分有四类、其中主要是胶原蛋白,其他是糖蛋白、蛋白多糖和弹性蛋白.近年来在肝病领域研究这些成分作为血清肝纤维化标志物的报道颇多,现就其中在临床上有实用价值的标志物简介如下.
胶原蛋白及其相关的酶:
1、在肝脏中胶原蛋自约占蛋白总量的5%~10%、肝纤维化时,胶原蛋白可增加到50%左右,因此,对胶原蛋白的测定可以不同程度反映肝纤维化的情况.至今发现人体胶原蛋白已有19种.在肝脏中存在的胶原为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、V、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ各型,其中含量最多的是Ⅰ和Ⅲ型,各占40%左右.正常肝脏每克含胶原量5.5土1.6mg,而肝硬化时可上升4~7倍,约30mg.各型胶原的比例随着肝纤维化的发展有所改变.胶原蛋白的合成系先经细胞内基因转录形成各型前胶原mRNA,继而通过翻译形成α-肽链形成螺旋结构,再经糖基化、羟化的修饰,而后经二硫键链结成前胶原.前胶原分泌至细胞外,由内肽酶将两端包括氨基端(N)和羧基端(C)切下,主体部分即为原胶原,经互相共价交联形成胶原纤维.
2、脯氨酸羟化酶:脯氨酸羟化酶(PH)是胶原合成的关键酶,由α、β两个亚单位构成四聚体.肝硬化病人的肝活检中PH有明显升高,但在血中测定PH活性有困难,因具有活性的PH四聚体不到10%,且血中存在抑制物.Salolainmen等用RIA法直接测定血中PH含量称血清免疫反应性PH(SIRPH),证明其含量与肝组织中PH活性相关.但其特异性不够高,由于血中α亚单位极易分解,而β亚单位比较稳定.Voshida等制备了PHβ亚单位单抗,应用酶联法测定免疫反应性PHβ亚单位(SIRβPH)则其特异性大为提高.多数学者认为SIRβPH主要反映肝纤维化的活动性.
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